Topvrouwen geeft inzicht in het werk en leven van vrouwen die aan het hoofd staan van grote non-profitorganisaties. De vier NGO-directeuren die centraal staan zijn: Liesbeth van Tongeren (Greenpeace), Louise van Deth (STOP AIDS NOW!), Mechteld van den Beld (Revalidatiefonds) en Marianne Verhoeven (Prinses Beatrix Fonds). Het werken voor een goede doelenorganisatie blijkt een ware missie te zijn die veel voldoening geeft, maar die ook zo zijn keerzijdes heeft.